类风湿关节炎是一种常见高发的自身炎症性、免疫性疾病，免疫系统会攻击健康的关节组织，标志性特征为关节滑膜炎。当炎症分子过度表达引起炎症细胞大量涌入，会触发滑膜炎症并导致血管翳形成，进一步侵蚀软骨及骨组织，导致不可逆的关节损伤，中晚期致残率高达60%-70%；更可怕的是，中晚期类风湿关节炎累及关节以外的内脏器官，如肺间质病变和类风湿结节、神经和心血管系统病变等，严重威胁患者身体和心理健康。然而，类风湿关节炎发病机制不明，导致早诊早治面临巨大挑战。

　　4月15日，深圳理工大学生物医学工程学院教授张鹏团队联合中国科学院深圳先进技术研究院刘成波、陈敬钦团队在Cell Reports Medicine上联合发表最新研究成果，探索炎症细胞靶向诊疗新技术，实现了类风湿关节炎滑膜巨噬细胞动态示踪与精准调控。

　　该文章首次揭示了RhoA基因在滑膜巨噬细胞促炎—破骨中的关键作用，为类风湿关节炎等炎症、免疫性重大疾病的个性化早诊早治提供了创新工具，也为疾病精准防控提供了全新方向。

　　文章上线截图

　　在类风湿关节炎患者和模型小鼠的滑膜组织中，科研人员发现RhoA蛋白在巨噬细胞中的表达显著升高，这一发现可能为治疗类风湿关节炎带来的骨骼损害开辟新途径。通过单细胞RNA测序分析、免疫荧光分析和类风湿关节炎模型小鼠观察实验，研究团队发现骨髓来源的巨噬细胞在经典破骨细胞诱导剂RANKL/M-CSF的作用下，RhoA能够迅速激活，参与破骨细胞形成过程。这些成果强调了RhoA在类风湿关节炎滑膜巨噬细胞中的关键角色，提示其作为治疗靶点的潜力，为理解类风湿关节炎的免疫病理机制和探索新型治疗策略提供了重要线索。

　　为了探究RhoA在巨噬细胞中对破骨细胞分化及关节破坏影响，科研团队通过Cre-loxp系统构建了特定的条件性敲除小鼠（RhoA-cKO），使得巨噬细胞中的RhoA基因被特异性移除。这些小鼠表现正常，繁殖符合遗传规律。通过DNA电泳验证，成功选定了RhoA-cKO小鼠用于实验。在胶原诱导性关节炎模型中，RhoA-cKO小鼠展现出显著减轻的关节肿胀、较低的平均爪厚度及临床评分，与未免疫的对照组相似，表明巨噬细胞中RhoA的缺失能预防炎症和水肿。进一步的免疫组化和wes43tern blot分析证实，这些小鼠的外周血来源的骨髓巨噬细胞中RhoA蛋白表达显著下降，验证了基因敲除的有效性。这项研究强调，巨噬细胞中RhoA的敲除能有效防止胶原诱导性关节炎模型中的关节破坏，为类风湿关节炎的治疗提供了新的靶点，预示着针对RhoA的疗法可能成为减轻RA患者关节损伤的关键策略。

　　此外，科研团队还成功开发了一种名为SMART-Cas9的基因编辑系统，旨在特异性编辑类风湿关节炎关节组织中巨噬细胞的RhoA基因，并利用非侵入性活体荧光成像技术，验证了SMART-Cas9在类风湿关节炎大鼠体内对关节巨噬细胞的特异性靶向能力。

　　研究示意图

　　该研究验证了RhoA在调节破骨细胞生成中的重要性及其作为类风湿关节炎治疗靶点的潜力，探索了使用CRISPR-Cas9基因编辑技术通过靶向巨噬细胞中的RhoA来治疗类风湿关节炎的途径，开发了一种称为SMART的策略，使用富含磷脂酰丝氨酸的巨噬细胞膜载体将CRISPR-Cas9靶向递送至巨噬细胞，以最小的毒性编辑RhoA。SMART-Cas9可以通过敲除炎症性关节炎中巨噬细胞的RhoA来有效减轻破骨细胞生成诱导的关节损伤。因此，SMART不仅提供了对类风湿关节炎治疗方法的见解，还为开发基因治疗开辟了一条途径。

　　张鹏、陈敬钦、刘成波为论文通讯作者，广东医科大学研究员陈建海和中国科学院深圳先进技术研究院硕士生谭键伟为论文共同第一作者。

（文章来源：读创）